Pipetten

Er zijn twee soorten pipetten: positive displacement pipetten en air displacement pipetten. Positive displacement pipetten worden vaak gebruikt voor monsters met een hoge viscositeit (bijv. glycerol) of hoge dampdruk (bijv. vluchtige stoffen zoals alcohol), terwijl air displacement pipetten kunnen worden gebruikt voor de meeste laboratoriumtoepassingen.

Moderne pipetten, ook wel micropipetten genoemd, werken met een piston-slagprincipe – vloeistof wordt gemeten met behulp van het zuiger-cilindersysteem in het handvat van de pipet. Wanneer de zuiger wordt ingedrukt en vervolgens langzaam wordt losgelaten, creëert de beweging van de zuiger een vacuüm in de pipetpunt en zuigt zo vloeistof op in de punt; wat aspiratie wordt genoemd.

Omdat de zuiger in een pipet ver van het vloeistofmonster verwijderd is, kan het luchtkussen tussen de zuiger en de vloeistof een aantal effecten hebben op de nauwkeurigheid van dit proces, afhankelijk van het vloeistoftype. Door op de zuiger met een pipetpunt vol vloeistof te drukken, wordt de vloeistof uit de punt verdreven; dit wordt doseren genoemd.

Positive displacement pipetten werken volgens een soortgelijk principe, maar de punt van het uitwerpsysteem bevat zijn eigen zuiger en daarom is er een minimaal luchtkussen tussen de zuiger (dat is een deel van de pipetpunt) en het vloeistofoppervlak.

De nauwkeurigheid van pipetten is het vermogen van een pipet om het volume af te geven dat is gespecificeerd op het ingestelde volume. Met andere woorden, de juistheid van een meting tot de werkelijke waarde hangt af van het samenspel van de elementen in het systeem.

Pipetteerprecisie is het vermogen van een pipet om consistent vloeistofvolumes van dezelfde grootte af te geven over meerdere aliquots. Een pipet kan nauwkeurig zijn met betrekking tot het keer op keer doseren van hetzelfde volume, maar onnauwkeurig omdat het niet lukt om het juiste volume af te geven. Een nauwkeurige en precieze pipet doseert bij elke dosering volumes op het beoogde volume.

De pipet, pipetpunt en de persoon die de pipet bedient, vormen een 3-delig systeem. De operator, de persoon die de pipet gebruikt om onderzoek te doen, heeft een hoge mate van invloed op de nauwkeurigheid van de resultaten. Daarom is het belangrijk dat operators worden getraind in het gebruik van een pipet. Enkele krachtige maar eenvoudige technieken kunnen de nauwkeurigheid van het pipetteren aanzienlijk verbeteren. De Rainin Pipetting Technique Poster biedt een goede samenvatting. Daarnaast biedt Rainin het online seminar Good Pipetting Practice aan om u te helpen bij het leren van de juiste manier om te pipetteren.

RAININ biedt een breed scala aan handmatige en elektronische pipetteerinstrumenten met één kanaal (monochannel), meerdere kanalen (multichannel) of hoge doorvoer maar ook kalibratieservices om ervoor te zorgen dat uw resultaten nauwkeurig blijven. De pipetten van RAININ zijn wereldwijd verkrijgbaar. Geïnteresseerd in de aanschaf van een pipet? Vraag bovenaan deze pagina een offerte aan.

Hoeveel een pipet kost, hangt af van het type pipet: mono- of multichannel, handmatig of elektronisch. De prijs van de pipet varieert op basis van precisie (specificaties), materialen en vakmanschap.

Pipetten worden wereldwijd gebruikt in laboratoria, waaronder deze die betrokken zijn bij biowetenschappelijke onderzoeksexperimenten, chemische tests en aardolie en voedselproductie. Ze worden gebruikt in elke industrie waar biologische tests een vereiste zijn.

Houd bij het kiezen van de geschikte pipet voor de taak rekening met een aantal factoren: het type vloeistof, het aantal replicaten, de tijdsgevoeligheid en het pipetteervolume.

Ten eerste, wat voor soort vloeistof pipetteert u?

• Een air displacement pipet werkt goed als de vloeistof waterig of bijna waterig is.
• Als de vloeistof stroperig of vluchtig is, levert een positive displacement pipet betere resultaten dan een air displacement pipet.
• Air displacement pipetten bevatten lucht die kan worden uitgerekt of samengedrukt bij het werken met viskeuze vloeistoffen of kan worden uitgezet door de snelle verdamping van een vluchtige vloeistof in de binnenkamer van de pipet.
• Pipetten met positive displacement hebben een zuiger die zich uitstrekt tot aan de opening van de spuitvormige punt. Hierdoor blijft de nauwkeurigheid van het pipetteren behouden door lucht uit het systeem te verwijderen. 

Het type vaten dat bij uw toepassing betrokken is en het aantal replicaten zijn ook kritische factoren bij het selecteren van een pipet.

• Een handmatige monochannel pipet werkt goed voor een klein aantal doseringen in de meeste buisjes en platen. Maar als u in veel wells of buisjes pipettert, kunnen multichannel pipetten en elektronische pipetten de pipetteerhand ontlasten.
• Multichannel pipetten vullen plaatrijen efficiënt en versies met adjustable spacer pipetten bieden u een handige manier om te schakelen tussen vaten met verschillende tussenafstanden, zoals buizen en platen.
• Elektronische pipetten bieden ook het extra voordeel dat ze meerdere aliquots doseren vanuit een enkele aspiratie, zelfs in een reeks van verschillende volumes. En met een cyclusteller helpen elektronische pipetten u bij te houden waar u zich bevindt in uw protocol.
• Overweeg een semi-geautomatiseerd pipetteerwerkstation met hoge doorvoer als het beoogde aantal replicaten meerdere platen vult.

Als uw protocol tijdgevoelig is, overweeg dan multichannel pipetten en pipetteersystemen met hoge doorvoer om het meeste te bereiken in de kortst mogelijke tijd. Elektronische versies van deze instrumenten kunnen de grootste tijdsbesparing opleveren.

Welk volume pipetteert u?

• Werk tussen 10-100% van het nominale volume van een pipet voor nauwkeurige resultaten.
• Volumes in de buurt van het volledige nominale volume van een pipet leveren de hoogste nauwkeurigheid.
• Vermijd pipetteren van 20 μl met een pipet van 1.000 μl. Pipetteer in plaats daarvan 20 μl met een pipet van 20 μl.
• De pipetgroottes variëren van 1 μl tot wel 20 ml, en zelfs grotere volumes kunnen nauwkeurig worden overgebracht met behulp van serologische pipetten.  

Kruisbesmetting kan experimenten doen ontsporen, dus hanteer een strikt beleid voor het wijzigen van de tip: één tip per monster. Gefilterde tips blokkeren aërosolen en door de pipet regelmatig af te vegen met ethanol worden oppervlakteresten verwijderd. Het onderhouden van een schone, ordelijke labtafel en het op de juiste manier opbergen van pipetten versterken deze inspanningen. De multichannel pipetten van Rainin, met hun veilige pasvorm en comfortabele bediening, maken het gemakkelijker om deze procedures toe te passen, omdat ze ervoor zorgen dat elke monsteroverdracht geïsoleerd en vrij van verontreiniging is.

Bij lage volumes kan zelfs een minuscuul druppeltje overgebleven reagens de resultaten vertekenen. Wees zorgvuldig bij het verwisselen van de tips tussen elk reagens en overweeg gefilterde tips om te voorkomen dat spuitbussen het lichaam van de pipet besmetten. Houd de pipet vrij van resten door deze regelmatig af te vegen met ethanol. De laboratoriumpipetten van RAININ, met pipetpunten die consistent passen en soepel en met minimale kracht worden uitgeworpen, maken het eenvoudiger om strenge reinheidsnormen te handhaven voor elk nieuw reagens dat u hanteert.