Micropipetas

Usamos micropipetas para transferir com precisão pequenos volumes de líquido de um tanque para outro. Por exemplo, usamos uma micropipeta para mover o líquido de um frasco de cultura celular para poços individuais em uma placa de micropoços. As micropipetas são usadas em ciência ambiental, química, desenvolvimento farmacêutico, ciência forense, laboratórios de biologia e muitas outras áreas.

Muitas micropipetas têm especificações de exatidão muito boas. Esses instrumentos têm o potencial de fornecer volumes com erros sistemáticos e aleatórios muito baixos. No entanto, a técnica do usuário da micropipeta pode afetar muito a exatidão. O ajuste adequado do volume, o pré-enxágue da ponteira da pipeta e a profundidade de imersão da ponteira, bem como a verticalidade e o ritmo da pipetagem podem influenciar a reprodutibilidade.  

As micropipetas são instrumentos de precisão que muitas vezes passam por uso intenso no laboratório; portanto, além das boas especificações e da técnica adequada, a micropipeta mais exata é aquela que é regularmente calibrada. Os intervalos de manutenção normalmente refletem a quantidade de uso de uma micropipeta.

Para usar uma micropipeta, primeiro defina e trave o volume. Em seguida, abaixe a extremidade líquida da micropipeta em uma ponteira de pipeta limpa e vazia. Certifique-se de que a ponteira da pipeta esteja montada com segurança na micropipeta para uma vedação hermética. Quando uma ponteira de pipeta estiver carregada em uma micropipeta manual, pressione o êmbolo até o primeiro estágio. Em modelos eletrônicos, após o volume ser definido e uma ponteira carregada, ela está pronta para aspirar.  

Segurando a micropipeta verticalmente, mergulhe a ponteira no líquido na profundidade adequada para o tamanho da ponteira. Mergulhar uma ponteira muito profundamente aumenta a pressão e pode transbordar a ponteira; imergir muito raso arrisca a aspiração de ar.  

Em uma micropipeta manual, libere lentamente a pressão no êmbolo para aspirar o volume de líquido definido. Em uma versão eletrônica, pressione o botão para aspirar.

Com o líquido dentro da ponteira, mova a micropipeta sobre o tanque-alvo. Em micropipetas manuais, pressione o êmbolo até o primeiro estágio para dispensar. Em uma micropipeta eletrônica, basta pressionar o botão de dispensação.  

Por fim, para limpar qualquer líquido restante, mova a micropipeta sobre um tanque de descarte desejado e, em micropipetas manuais, pressione o êmbolo até a segunda parada de "expulsão". Em micropipetas eletrônicas, use o botão para soprar qualquer líquido residual.

Para minimizar a possibilidade de erros ao trabalhar com uma micropipeta, comece com um sistema completo de micropipeta e ponteira, garantindo o encaixe hermético adequado.  

Mantenha a micropipeta o mais vertical possível durante o trabalho. Em micropipetas manuais, defina o volume girando um pouco o micrômetro acima do volume pretendido. Em seguida, abaixe-a até o número desejado. Cada vez que carregar uma nova ponteira, faça o pré-enxágue para otimizar as condições dentro da ponteira para uma pipetagem altamente precisa. Conforme aspira e dispensa, mantenha a velocidade consistente, mantendo o mesmo ritmo durante toda a etapa do protocolo.  

Dispensar abaixo da superfície do líquido-alvo quando possível ou tocar - limpando a ponteira na parede interna do tanque à medida que você completa a dispensação - são as duas maneiras de maximizar a exatidão do volume que você está dispensando.

Pessoas diferentes referem-se aos mesmos tipos de instrumentos, das duas maneiras: algumas as chamam de pipetas e outras as chamam de micropipetas. O uso popular reuniu esses termos para se referirem aos mesmos instrumentos, embora as micropipetas possam ser definidas de forma mais restrita como instrumentos capazes de microinjetar fluido diretamente nas células. Pipetas, um termo mais amplo, abrangem instrumentos que variam desde gotejadores a olho e tubos operados pela boca até pipetas sorológicas e sistemas de pipetagem de alto rendimento.

As micropipetas são pipetas capazes de medir e dispensar soluções líquidas na faixa de volume de 1 a 1.000 μL. Elas são comumente usadas em pesquisas relacionadas às ciências da vida, nas quais são necessárias medição e dispensação exatas de soluções.